常用名

MPS1-IN-1

英文名

Mps1-IN-1

CAS號(hào)

1125593-20-5

分子量

535.65800

密度

無(wú)資料

沸點(diǎn)

無(wú)資料

分子式

C28H33N5O4S

熔點(diǎn)

無(wú)資料

閃點(diǎn)

無(wú)資料

體外研究

Mps1-IN-1是一種有效的，選擇性和ATP競(jìng)爭(zhēng)性Mps1激酶抑制劑，IC50和Kd分別為367 nM和27 nM。 Mps1-IN-1對(duì)ALK和LTK也具有高親和力，Kds分別為21和39nM，但對(duì)其他352種成員激酶幾乎沒(méi)有抑制作用。 Mps1-IN-1（5,10μM）誘導(dǎo)在U2OS細(xì)胞中繞過(guò)檢查點(diǎn)介導(dǎo)的有絲分裂停滯。 Mps1-IN-1破壞Mad2向動(dòng)粒的募集，并降低蘇氨酸-232（Thr232）處Aurora B的磷酸化狀態(tài)。 Mps1-IN-1（10μM）對(duì)中心體復(fù)制沒(méi)有影響。此外，Mps1-IN-1（5-10μM）抑制HCT116的增殖能力[1]。

激酶實(shí)驗(yàn)

通過(guò)監(jiān)測(cè)來(lái)自激酶活性位點(diǎn)的熒光標(biāo)記的ATP定點(diǎn)激酶抑制劑（激酶示蹤劑236）的置換，使用激酶結(jié)合測(cè)定來(lái)評(píng)估化合物與TTK的結(jié)合。每個(gè)15μL測(cè)定包含5 nM TTK，可變量的測(cè)試化合物（Mps1-IN-1），30 nM激酶示蹤劑236,2 nM Eu-anti-GST抗體和1％DMSO（來(lái)自化合物稀釋的殘留物）在激酶緩沖液中A（50mM HEPES pH 7.5,10mM MgCl 2,1mM EGTA，0.01％Brij-35）。通過(guò)將5μL測(cè)試化合物（來(lái)自2倍稀釋系列）添加至5μL激酶/抗體混合物，然后添加5μL抗體來(lái)啟動(dòng)結(jié)合測(cè)定。使用標(biāo)準(zhǔn)的基于Eu的TR-FRET設(shè)置讀取測(cè)定板，其中在340nm處激發(fā)并且在615nm（供體）和665nm（受體）處監(jiān)測(cè)發(fā)射。在激發(fā)后延遲100μs后，在200μs窗口內(nèi)測(cè)量發(fā)射強(qiáng)度[1]。